Hovedforskjell - kapillær elektroforese vs gelelektroforese
Elektroforese er en teknikk som brukes til å skille biomolekyler basert på partikkeladning, partikkelstørrelse og partikkelform. Migrasjonen av molekylet, kjent som elektroforetisk mobilitet, avhenger av hvilken type polymer / gel som brukes, porestørrelse, spenning som tilveiebringes, kjøretid og forholdet mellom overflate og volum. Det finnes forskjellige typer elektroforeseteknikker basert på hvilken type biomolekyl som brukes. Den første typen elektroforese som ble oppfunnet, var papirelektroforese der et nitrocellulosepapir ble brukt som medium for separasjon av biomolekyler. Prinsippet om gelelektroforese der geler med forskjellige porestørrelser ble brukt til å skille biomolekyler, ble oppfunnet senere. Gelelektroforeseteknikk ble ytterligere modifisert for å forbedre nøyaktigheten av teknikken, og en slik modifikasjon er kapillærelektroforese. Hovedforskjellen mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese er at gelelektroforese utføres i vertikalt eller horisontalt plan ved bruk av en polymergel av standard porestørrelse, mens kapillærelektroforese utføres i et kapillarrør med en polymervæske eller en gel.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er gelelektroforese
3. Hva er kapillærelektroforese
4. Likheter mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese
5. Sammenligning side ved side - Kapillærelektroforese vs gelelektroforese i tabellform
6. Oppsummering
Hva er gelelektroforese?
Gelelektroforese er en teknikk som brukes til å skille hovedsakelig nukleinsyrer, proteiner eller aminosyrer basert på ladning, størrelse og form. Denne teknikken bruker en fysisk gel, som er en polymer substans, som separasjonsmedium. Mest brukte geler er agarose (for nukleinsyreseparasjon) og polyakrylamid (for proteinseparasjon). Gelelektroforetisk apparat inneholder gelstøpebrettet for å forberede gelen, støpekammer for å forberede brønnene, buffertank, elektroder - positive (anode) og negative (katoder) og spenningsforsyningsenheten. Molekyler som DNA eller RNA, som er negativt ladet, beveger seg fra katoden til anoden, og molekyler som er positivt ladede beveger seg omvendt. Gelpreparasjon gjøres i henhold til kravet. Hvis det kreves høy oppløsning eller separasjon av molekyler,en gel med høy konsentrasjon med mindre porestørrelse skal tilberedes. Molekylene separert på gelmatrisen observeres etter en fargeteknikk. De separerte molekylene vises som bånd på gelmatrisen.
Figur 01: Gelelektroforese
Gelelektroforese brukes i molekylær diagnostikk som DNA-fingeravtrykk for å bestemme tilstedeværelsen av et bestemt DNA / RNA-fragment eller et protein. Gelelektroforese bestemmer også renheten til den ekstraherte prøven av biomolekyler. Gelelektroforese utføres som et foreløpig trinn for inn- og hybridisering og som en bekreftende analyse etter sekvensering.
Hva er kapillær elektroforese?
Kapillærelektroforese er en modifikasjon av gelelektroforese som bruker samme prinsipp for separasjon basert på ladning, størrelse på molekylet, men utføres i et kapillarrør med enten et gelstoff eller en flytende polymer. Kapillærer er fremstilt av smeltet silisiumdioksyd, og hvert kapillarrør har en innvendig diameter på 50-100 μm og er 25-100 cm lang. Prøver injiseres i kapillarrøret som inneholder polymermaterialet og separeres mye raskt enn konvensjonell gelelektroforese. Kapillærsystemet er godt beskyttet inne i en isolasjonsmantel som beskytter prøven mot forurensning. Kapillærer kan fylles med flytende polymerer som hydroksyetylcellulose eller høyoppløselige geler som polyakrylamid. Kapillærelektroforese gir større oppløsning; derav separasjon er mer nøyaktig. Kapillærelektroforese bruker et automatisert detektorsystem via spektrofotometrisk analyse. Dette skyldes det høyere overflatearealet til volumforholdet.
Figur 02: Kapillær elektroforese
Kapillærelektroforese brukes i situasjoner som i rettsmedisin der høyere nøyaktighet er nødvendig og ikke ofte brukes, da det er kostbar teknikk.
Hva er likhetene mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese?
- Separasjon av molekyler i begge teknikkene er basert på ladningen og størrelsen på molekylet.
- Begge teknikkene kan brukes til å skille både nukleinsyrer og proteiner.
- Eksempelvolumet til begge teknikkene er det samme.
- Begge teknikkene bruker en buffer for å lette separasjon.
Hva er forskjellen mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese?
Diff Article Midt før tabell
Kapillærelektroforese vs gelelektroforese |
|
| Kapillærelektroforese er en teknikk som skiller biomolekyler på et kapillarrør ved bruk av et væske- eller gelpolymermedium. | Gelelektroforese er en teknikk som skiller biomolekyler på et vertikalt eller horisontalt plan ved hjelp av et polymergelmedium. |
| Atskillelse | |
| Ved kapillærelektroforese utskilles det inne i et kapillarrør. | Ved gelelektroforese gjøres separasjon på et vertikalt eller horisontalt plan. |
| Separasjonsmedium | |
| Flytende polymerer som hydroksyetylcellulose brukes i kapillærelektroforese. | Geler, enten agarose eller polyakrylamid, brukes som medium i gelelektroforese. |
| Tverrkobling | |
| Høy oppløsning kan fås fra kapillær elektroforese. | Oppløsningen har lav gelelektroforese. |
| Forhold mellom overflate og volum | |
| Forholdet mellom overflate og volum er høyt i kapillærelektroforese. | Forholdet mellom overflate og volum har lite gelelektroforese. |
| Deteksjonsteknikk | |
| Påvisning gjøres gjennom spektrofotometriske automatiserte detektorer i kapillærelektroforese. | Farging og observasjon gjennom UV-transilluminator gjøres som påvisningsteknikker i gelelektroforese. |
Sammendrag - Kapillærelektroforese vs gelelektroforese
Molekylær diagnostikk spiller en viktig rolle i den vitenskapelige verden. Identifikasjon og rensing av DNA, RNA og proteiner er kritiske trinn i diagnostiske prosedyrer. Elektroforese er en teknikk som skiller og identifiserer biomolekyler i både gelelektroforese og den mye avanserte kapillærgelelektroforesen. Gelelektroforese utføres i vertikalt eller horisontalt plan ved bruk av en polymergel med standard porestørrelse, mens kapillærelektroforese utføres i et kapillarrør med en polymervæske eller en gel. Dette er forskjellen mellom kapillærelektroforese og gelelektroforese. Etter fullført elektroforeseteknikk blir biomolekylene videre behandlet for å oppnå høyere nivåinformasjon via hybridisering eller gjennom teknikker som fingeravtrykk.
Last ned PDF-versjon av kapillærelektroforese vs gelelektroforese
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til frakoblede formål som angitt i en henvisning. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom gelelektroforese og kapillær elektroforese.
