Elektroforese vs elektroosmose
Fysiske separasjonsmetoder som filtrering, destillasjon, kolonnekromatografi er ikke enkle metoder når det gjelder separasjon av noen molekyler. Elektroforese og elektro-osmose er to andre separasjonsteknikker som kan brukes til å skille ladede partikler.
Hva er elektroforese?
Elektroforese er en teknikk for å skille molekyler basert på deres størrelse. Grunnleggende for denne separasjonen er ladningen til molekylet og deres evne til å bevege seg i et elektrisk felt. Dette er den vanligste og viktigste teknikken i molekylærbiologi for å skille molekyler, spesielt DNA og proteiner. Dette er stort sett i bruk fordi det er relativt enkelt og billig. Apparatet for elektroforese kan være litt komplisert, og forberedelse av det tar litt tid. Men vi kan enkelt lage et elektroforeseapparat av de tingene vi har i laboratoriet. Elektroforeseteknikker kan variere avhengig av våre formål. Vi kan bruke en dimensjonal elektroforese for separasjon av DNA eller protein. To-dimensjonal elektroforese brukes når flere løse prøver er påkrevd (som i tilfelle finger utskrift). En gel brukes som støttemedium for å skille molekylene. Denne gelen kan tilberedes som flate ark eller i rør. Grunnlaget for denne prosedyren er å skille molekyler avhengig av deres hastighet på bevegelse gjennom en gel når et elektrisk felt tilføres. Negativt ladede molekyler som DNA har en tendens til å bevege seg mot den positive polen i dette elektriske feltet, mens positivt ladede molekyler har en tendens til å reise til den negative polen. To typer geler brukes i elektroforese som agarose og polyakrylamid. Disse to har forskjellige oppløsningsevner. Gelen fungerer som en sil for å filtrere de forskjellige størrelsene på molekyler. De elektrostatiske ladningene som er satt opp i gelen fungerer som kraften. Grunnlaget for denne prosedyren er å skille molekyler avhengig av deres bevegelseshastighet gjennom en gel når et elektrisk felt tilføres. Negativt ladede molekyler som DNA har en tendens til å bevege seg mot den positive polen i dette elektriske feltet, mens positivt ladede molekyler har en tendens til å reise til den negative polen. To typer geler brukes i elektroforese som agarose og polyakrylamid. Disse to har forskjellige oppløsningsevner. Gelen fungerer som en sil for å filtrere de forskjellige størrelsene på molekyler. De elektrostatiske ladningene som er satt opp i gelen fungerer som kraften. Grunnlaget for denne prosedyren er å skille molekyler avhengig av deres bevegelseshastighet gjennom en gel når et elektrisk felt tilføres. Negativt ladede molekyler som DNA har en tendens til å bevege seg mot den positive polen i dette elektriske feltet, mens positivt ladede molekyler har en tendens til å reise til den negative polen. To typer geler brukes i elektroforese som agarose og polyakrylamid. Disse to har forskjellige oppløsningsevner. Gelen fungerer som en sil for å filtrere de forskjellige størrelsene på molekyler. De elektrostatiske ladningene som er satt opp i gelen fungerer som kraften. Disse to har forskjellige oppløsningsevner. Gelen fungerer som en sil for å filtrere de forskjellige størrelsene på molekyler. De elektrostatiske ladningene som er satt opp i gelen fungerer som kraften. Disse to har forskjellige oppløsningsevner. Gelen fungerer som en sil for å filtrere de forskjellige størrelsene på molekyler. De elektrostatiske ladningene som er satt opp i gelen fungerer som kraften.
Separasjon avhenger av ionenes mobilitet.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = kraft som virker på en partikkel
f = friksjonskoeffisient
V = gjennomsnittlig migreringshastighet
Z = ladning av den migrerende partikkelen
e = grunnladning
E = styrke på det elektriske feltet
De nødvendige forholdene for elektroforese er relativt enkle. Når du lager gelen og kjører prøven, brukes en buffer. Markører og fargestoffer brukes til visualiseringsformål.
Hva er elektro-osmose?
Dette er prosessen med å flytte en væske gjennom et materiale ved hjelp av et påført elektrisk felt. Bevegelsen kan være gjennom et porøst materiale, langs en kapillær, membran osv. Dette kan brukes som en separasjonsteknikk (spesielt kapillær elektro-osmose). Væskens hastighet er lineært proporsjonal med det påførte elektriske feltet. Det er også avhengig av materialet som brukes til å bygge kanalen og løsningen som brukes. I grensesnittet har løsning og materiale oppnådd motsatte ladninger, og dette er kjent som et elektrisk dobbeltlag. Når et elektrisk felt påføres løsningen, beveger det elektriske dobbeltlaget seg med den resulterende Coulomb-kraften. Dette er kjent som den elektro-osmotiske strømmen.
Hva er forskjellen mellom elektroforese og elektro-osmose?
• I elektroforese flyttes faste partikler (makromolekyler som nukleinsyrer eller proteiner) ved hjelp av et elektrisk felt. Men i elektro-osmose beveger en væske seg.
• Ved elektroforese er det faste bærermaterialet en gel. Men det elektro-osmose det kan være en gel, membran, kapillær, etc.
