Nøkkelforskjell - Gram Stain vs Culture
Gram flekk er en fargeteknikk som utføres for å skille bakterier i to grupper i henhold til tykkelsen på peptidoglykan laget i celleveggen. Kultur er en metode for å dyrke og vedlikeholde mikroorganismer under laboratorieforhold for forskjellige analyser. Hovedforskjellen mellom gram flekk og kultur er deres funksjon; gram sil en fargeteknikk av bakterier der kultur er en metode for dyrking og vedlikehold av mikroorganismer.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er gramflekk
3. Hva er kultur
4. Sammenligning side om side - Gramflekk vs kultur
5. Sammendrag
Hva er Gram Stain?
Gram flekk er en viktig differensial fargingsteknikk som brukes til bakteriell identifikasjon i mikrobiologi. Denne teknikken ble introdusert av den danske bakteriologen Hans Christian Gram i 1884. Gramfarging kategoriserer bakterier i to hovedgrupper: grampositive og gramnegative; disse er veldig viktige i bakterieklassifisering og identifikasjon. Gramfarging utføres som et første trinn for bakteriekarakterisering.
Bakterier er gruppert basert på forskjellene i celleveggen. Grampositive bakterier inneholder et tykt peptidoglykanlag i celleveggen mens gramnegative bakterier inneholder et tynt peptidoglycan-lag i celleveggen som vist i figur 01. Resultatet av gramfarging vil være basert på tykkelsesforskjellen i peptidoglycan-laget av celleveggen.
Figur 1: Grampositive bakterier og Gram-negative bakterier
Gramfarging utføres ved bruk av fire forskjellige reagenser, nemlig; primær flekk, mordant, avfargingsmiddel og motflekk. Krystallfiolett og safranin tjener som henholdsvis primær- og motflekker, mens gram jod og 95% alkohol tjener som henholdsvis mordant og avfargingsmiddel.
Grunnleggende trinn for Grams Stain
- En bakteriell utstrykning tilberedes på et rent glass, skylles og kjøles.
- Smøre oversvømmes med krystallfiolett i 1-2 minutter.
- Smøre skylles med sakte rennende vann fra springen for å fjerne overflødige flekker.
- Gramjod påføres smøre i 1 minutt.
- Smøre skylles med sakte rennende vann fra springen
- Smøre vaskes med 95% alkohol i 2-5 sekunder og skylles med sakte rennende vann fra springen.
- Smøre er motfarget med safranin i 1 minutt
- Smøre skylles med sakte rennende vann fra springen, tørkes og observeres under mikroskopet.
På slutten av gram flekken vil gram negative bakterier bli observert i rosa farge mens de gram positive bakteriene vil bli observert i lilla farge som vist i figur 02. Utfallet av gram flekken avgjøres av tykkelsen på peptidoglykan laget i celleveggen deres. Under avfargingstrinnet fjernes primær flekk og mordant lett fra de gramnegative bakteriene og blir fargeløse siden de har et tynt peptidoglykanlag. Den primære flekken beholdes i de gram-positive bakteriene siden de har et tykt peptidoglykanlag. Motflekk vil ikke være effektiv for gram-positive bakterier på grunn av oppbevaring av den primære flekken. Så gram-positive bakterier vil være synlige i primær flekkfarge, dvs. lilla farge. Motflekk flekker de gramnegative bakteriene og vil være synlig i plukkfarge som er safraninfargen. Derfor er det enkelt å kategorisere bakterier i to grupper etter gramflekken, og det er verdifullt i bakteriell differensiering og identifikasjon.
Figur 2: gramstamme
Hva er kultur?
Mikrobiell kultur er en metode for dyrking og vedlikehold av mikroorganismer under laboratorieforhold for forskjellige formål. Kulturer dyrkes i faste, halvfaste og flytende medier basert på typen og formålet med mikroorganismedyrking. Kulturer er utstyrt med nødvendige næringsstoffer og vekstbetingelser som kreves av mikroorganismer. Det er forskjellige komponenter i et kulturmedium som energikilde, karbonkilde, nitrogenkilde, mineraler, mikronæringsstoffer, vann, størkningsmiddel osv. Optimal temperatur, oksygen og pH bør justeres i henhold til typen av mikroorganismen som dyrkes.
Det finnes forskjellige typer mikrobielle kulturer; for eksempel batchkultur, kontinuerlig kultur, stabkultur, agarplatekultur, buljongkultur, etc. I henhold til sammensetningen av dyrkningsmediet er det forskjellige typer kulturmedier kjent som syntetiske medier, halvsyntetiske medier og naturlige medier. Mikrobielle kulturer fremstilles under sterile forhold inne i et spesielt kammer som kalles laminær luftstrøm. Vekstmedium og glassvarer steriliseres før inokulering av ønsket mikroorganisme. Under riktige sterile forhold overføres målmikroorganisme til det steriliserte næringsmediet og inkuberes ved optimal temperatur. Inne i mediet vil mikroorganismen vokse og formere seg ved hjelp av næringsstoffene.
Figur 3: En bakteriekultur på plate
Hva er forskjellen mellom Gram Stain og Culture?
Diff Article Midt før tabell
Gram Stain vs Culture |
|
| Gramsstamme er en differensiell fargeteknikk som brukes til bakteriedifferensiering og identifikasjon. | Mikrobiell kultur er en metode for å dyrke mikroorganisme i laboratoriet. |
| Komponenter | |
| Dette bruker forskjellige reagenser, inkludert to flekker. | Dette bruker forskjellige kulturmedier som faste, halvfaste og flytende medier sammensatt av næringsstoffer og andre nødvendige forhold. |
| Grunnleggende funksjoner | |
| Dette tillater gruppering av bakterier i to grupper: gram negative og gram positive. | Dette tillater multiplikasjon av mikroorganismer for forskjellige formål. |
| Utgangspunkt | |
| Gram flekk utfallet er basert på forskjellene i peptidoglycan laget av celleveggen. | Mikroorganismer vil vokse og formere seg i kulturmediene. |
| Utfall | |
| Gramnegative bakterier er synlige i rosa farge og gram positive bakterier er synlige i lilla farge. | På plater kan man se kolonier av mikroorganismer. På flytende medier er mikroorganismer i suspendert form. |
Sammendrag - Gram Stain vs Culture
Mikrobielle kulturer fremstilles og vedlikeholdes under laboratorieforhold for forskjellige formål, for eksempel lagring, testing, kjemisk rensing, etc. Gram flekk er en fargeprosedyre som skiller bakterier i to hovedgrupper kalt gramnegative bakterier og gram positive bakterier. Derfor er forskjellen mellom gram flekken og kulturen at gram flekken er en fargeteknikk av bakterier mens kulturen er en metode for dyrking og vedlikehold av mikroorganismer i laboratoriene.
