Hovedforskjell - Gram Stain vs Acid Fast
Bakterier er veldig små mikroorganismer. De er gjennomsiktige, og det er vanskelig å oppdage dem under leve- og ustøpte forhold. Dermed er forskjellige fargemetoder utviklet for å lette deteksjon av bakterier. Det er tre hovedtyper av fargingsteknikker: enkel farging, differensialfarging og strukturell farging. Differensiell farging er en teknikk som bruker mer enn en flekk for å skille bakterier. Gramflekk og syrefast flekk er mest kjent som differensialflekker. Gramfarging er en differensiell fargeteknikk som skiller bakterier i to grupper kjent som Gram-positive bakterier og Gram-negative bakterier. Den syrefast flekken er en differensiell flekk som brukes til å identifisere syre-raske organismer som Mycobacterium fra ikke-sure raske organismer. Dette er nøkkelforskjellen mellom Gram-flekk og Acid Fast-flekk.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er gramflekk
3. Hva er syrefast
4. Likheter mellom gramflekk og syrefast
5. Sammenligning side om side - Gramflekk vs syrefast i tabellform
6. Oppsummering
Hva er Gram Stain?
Gram flekk er en viktig differensiell fargeteknikk som brukes til bakteriell identifikasjon i mikrobiologi. Denne teknikken ble introdusert av den danske bakteriologen Hans Christian Gram i 1884. Gramfarging kategoriserer bakterier i to hovedgrupper kalt grampositive og gramnegative, noe som er veldig viktig i bakterieklassifisering og identifikasjon. Mikrobiologer utfører gramfarging som et første trinn i bakteriekarakterisering under studiene.
Bakterier er gruppert basert på forskjellene i celleveggen. Grampositive bakterier består av et tykt peptidoglykanlag i celleveggen mens gramnegative bakterier består av et tynt peptidoglycan-lag i celleveggen. Resultatet av gramfarging vil være basert på forskjellen i tykkelsen på peptidoglykanlaget i celleveggen.
Gramfarging utføres ved bruk av fire forskjellige reagenser, nemlig; primær flekk, mordant, avfargingsmiddel og motflekk. Krystallfiolett og safranin brukes som henholdsvis primær- og motflekker, mens gram jod og 95% alkohol brukes som henholdsvis mordant og avfettingsmiddel. De grunnleggende trinnene i gram flekk er som følger;
- En bakteriell utstrykning tilberedes på et rent glass, skylles og kjøles.
- Smøre oversvømmes med krystallfiolett i 1-2 minutter.
- Smøre skylles med sakte rennende vann fra springen for å fjerne overflødige flekker.
- Gramjod påføres smøre i 1 minutt.
- Smøre skylles med sakte rennende vann fra springen
- Smøre vaskes med 95% alkohol i 2-5 sekunder og skylles med sakte rennende vann fra springen.
- Smøre er motfarget med safranin i 1 minutt
- Smøre skylles med sakte rennende vann fra springen, tørkes og observeres under mikroskopet.
På slutten av gramflekken blir gramnegative bakterier observert i rosa farge, mens gram positive bakterier blir observert i lilla farge.
Figur 01: Gramnegative og Gram-positive bakterier
Resultatet av gramfargen avgjøres av tykkelsen på peptidoglykanlaget i celleveggen. Under avfargingstrinnet fjernes primær flekk og mordant lett fra de gramnegative bakteriene og blir fargeløse siden de har et tynt peptidoglykanlag. Den primære flekken beholdes i de gram-positive bakteriene siden de har et tykt peptidoglykanlag. Motflekken vil ikke være effektiv for gram-positive bakterier på grunn av oppbevaring av den primære flekken. Dermed vil gram-positive bakterier være synlige i primær flekkfarge, det vil si lilla farge. Motflekken vil flekke de gramnegative bakteriene, og de vil være synlige i plukkfarge, som er safraninfargen. Derfor er det enkelt å kategorisere bakterier i to grupper etter gram flekk, og det er verdifullt i bakteriell differensiering og identifikasjon.
Hva er syrefast?
Syrefasthet er en fysisk egenskap for visse bakterier, spesielt deres motstand mot avfarging av syrer under fargeprosedyrer. Når de er farget, motstår disse organismer fortynnet syre og / eller etanolbasert avfarging som er vanlig i mange fargeprotokoller. Dermed er navnet "surt raskt" gitt til disse organismer. Denne egenskapen er vist på grunn av å ha et høyt nivå av voksaktig materiale (mykoliske syrer) i celleveggene. Denne testen er kritisk for identifisering av Mycobacterium tuberculosis.
Figur 2: Syrehurtige mykobakterier
Denne syre raske flekken ble utviklet av Paul Ehrlich i 1882. Ehrlichs syre raske teknikk ble modifisert av Ziehl-Neelsen og den brukes nå oftere. Syre hurtig farging prosedyre involverer tre forskjellige reagenser. Carbol fuschin brukes som den primære flekken. Syrealkohol brukes som avfargingsmiddel. Metylenblått brukes som motflekk. Fargeprosedyre utføres som følger.
- Den primære flekken (carbol fuchsin) påføres den faste prøven på lysbildet (Alle celler blir farget i rød farge).
- Lysbildet oppvarmes ved å dampe i 5 minutter, som driver flekkene riktig inn i cellene.
- Deretter tilsettes avfargeløsningen (Dette fjerner det røde fargestoffet fra alle celler bortsett fra de syrefaste bakteriene).
- Metylenblått tilsettes som motflekk (Den farger alle avfargede bakterieceller).
- Syrehurtige bakterier forblir røde mens ikke-syrehurtige bakterier flekker i blått.
Hva er likhetene mellom gramflekk og syrefast?
- Gram flekk og syrerask er to forskjellige fargeteknikker.
- Begge teknikkene kategoriserer bakterier i to grupper.
- Begge teknikkene bruker to flekker og en avfarging.
Hva er forskjellen mellom gramflekk og syrefast?
Diff Article Midt før tabell
Gram Stain vs Acid Fast |
|
| Gramfarging er en differensiell fargeteknikk som skiller bakterier i to grupper Gram-positive bakterier og Gram-negative bakterier. | Acid Fast flekk er en differensial flekk som brukes til å identifisere syre-raske organismer fra ikke-sure raske organismer. |
| Primær flekk | |
| Krystallfiolett er den vanligste primære flekken i gramfarging. | Carbol fuchsin er den primære flekken som brukes i syrefast. |
| Avfargingsmiddel | |
| 95% alkohol brukes som avfargingsmiddel i gram flekk. | Syrealkohol brukes som avfargingsmiddel i syrefast. |
| Motflekk | |
| Gram flekk bruker safranin som motflekk. | Syrefast flekk bruker metylenblått som motflekk. |
| Observasjon | |
| Gramnegative bakterier observeres i plukkfarge og grampositive bakterier observeres i lilla farge. | Syrehurtige bakterier blir observert i rød farge og ikke syrehurtige bakterier observeres i blå farge. |
Sammendrag - Gram Stain vs Acid Fast
Visualisering av mikroorganismer i levende tilstand er vanskelig. Derfor brukes biologiske flekker og fargeprosedyrer i stor grad for å studere egenskapene. Differensiell farging er en type fargeteknikk som brukes til å skille bakterier. Gramflekk og syrefast flekk er to forskjellige fargeteknikker. Gramfarging skiller gramnegative bakterier og grampositive bakterier basert på tykkelsen på celleveggene. Syrehurtig farging skiller syrehurtige bakterier fra ikke syrehurtige bakterier basert på mykolsyreinnholdet i celleveggen. Dette er forskjellen mellom syrefast og gram flekk.
Last ned PDF-versjon av Gram Stain vs Acid Fast
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til frakoblede formål som angitt i en henvisning. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom gramflekk og syrefast.
