Nøkkelforskjell - flowcytometri vs FACS
I sammenheng med celleteori er celler den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cellesortering er en metodikk som brukes til å skille forskjellige celler i henhold til de fysiologiske og morfologiske egenskapene. De kan ha intracellulære eller ekstracellulære egenskaper. Interaksjon mellom DNA, RNA og proteiner betraktes som interracellulære interaktive egenskaper, mens form, størrelse og forskjellige overflateproteiner regnes som ekstracellulære egenskaper. I dagens vitenskap har cellesorteringsmetoder ført til å hjelpe de forskjellige undersøkelsene i biologiske studier og også til å etablere nye prinsipper gjennom forskning på medisin. Cellesortering utføres på forskjellige metoder som inkluderer både primitive med mindre utstyr og avanserte teknologiske metoder med bruk av sofistikerte maskiner. Strømningscytometri, fluorescerende aktivert cellesortering (FACS), magnetisk cellevalg og enkeltcellsortering er de viktigste metodene som brukes. Flowcytometri og FACS er utviklet for å skille celler i henhold til deres optiske egenskaper. FACS er en spesialisert type strømningscytometri. Flowcytometri er en metodikk som brukes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess der en prøveblanding av celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er nøkkelforskjellen mellom flowcytometri og FACS.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er flowcytometri
3. Hva er FACS
4. Likheter mellom flowcytometri og FACS
5. Sammenligning ved siden av hverandre - Flowcytometri vs FACS i tabellform
6. Oppsummering
Hva er flowcytometri?
Flowcytometri er en metode som brukes til å undersøke og bestemme ekspresjonen av intracellulære molekyler og celleoverflaten og til å definere og karakterisere forskjellige celletyper. Det brukes også til å bestemme cellevolum og cellestørrelse og for å evaluere renheten til underpopulasjoner som er isolert. Dette tillater flerparameterevaluering av enkeltceller omtrent samtidig. Flowcytometri brukes til å måle fluorescensintensiteten som produseres på grunn av fluorescerende merkede antistoffer som hjelper til med å identifisere proteiner eller ligander som binder til assosierte celler.
Figur 01: Flowcytometri
Generelt inkluderer flowcytometri tre undersystemer hovedsakelig. De er fluidikk, elektronikk og optikk. I strømningscytometri er fem hovedkomponenter tilgjengelig som brukes i cellesortering. De er en strømningscelle (en væskestrøm som brukes til å transportere dem og justere cellene for optisk senseprosess), et målesystem (kan være av forskjellige systemer, inkludert kvikksølv- og xenonlamper, vannkjølet med høy effekt eller lavkraftige luftkjølte lasere eller diodelasere), en ADC; Analog til Digital Converter-system, forsterkningssystem og en datamaskin for analyse. Oppkjøpet er prosessen der dataene samles inn fra prøvene ved hjelp av strømningscytometer. Denne prosessen formidles av en datamaskin som er koblet til strømningscytometeret. Programvaren som finnes i datamaskinen analyserer informasjonen som mates til datamaskinen fra strømningscytometeret. Programvaren har også muligheten til å justere parametere for eksperimentet som styrer flowcytometeret.
Hva er FACS?
I sammenheng med flowcytometri er fluorescens-aktivert cellesortering (FACS) en metode som brukes til å differensiere og sortere en prøve av en blanding av biologiske celler. Cellene er skilt fra to eller flere beholdere. Sorteringsmetoden er basert på de fysiske egenskapene til cellen som inkluderer lysspredning og cellefluorescensegenskaper. Dette er en viktig vitenskapelig teknikk, som kan brukes til å oppnå pålitelige kvantitative og kvalitative resultater av fluorescenssignaler som sendes ut fra hver celle. Under FACS, i utgangspunktet, den forhåndsoppnådde blandingen av celler; en suspensjon er rettet mot sentrum av en smal væskestrøm som flyter raskt. Væskestrømmen er designet for å skille cellene i suspensjonen basert på diameteren til hver celle. En vibrasjonsmekanisme påføres suspensjonsstrømmen som resulterer i dannelsen av individuelle dråper.
Figur 02: FACS
Systemet er kalibrert for å lage en enkelt dråpe med en celle. Rett før dannelsen av dråper beveger strømningssuspensjonen seg langs et fluorescensmåleapparat som oppdager fluorescenskarakteristikken til hver celle. På dannelsespunktet for dråper plasseres en elektrisk ladering som en ladning induseres til ringen før målingen av fluorescensintensiteten. Når dråpene er dannet fra suspensjonsstrømmen, blir en ladning fanget i dråpene som deretter kommer inn i et elektrostatisk avbøyningssystem. I følge avgiften leder systemet dråpene i forskjellige beholdere. Metoden for påføring av ladningen varierer i henhold til forskjellige systemer som brukes i FACS. Utstyret som brukes i FACS er kjent som en fluorescensaktivert cellesorterer.
Hva er likheten mellom flowcytometri og FACS?
Flowcytometri og FACS er utviklet for å skille celler i henhold til deres optiske egenskaper
Hva er forskjellen mellom flowcytometri og FACS?
Diff Article Midt før tabell
Flowcytometri vs FACS |
|
| Flowcytometri er en metodikk som brukes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. | FACS er en prosess der en prøveblanding av celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. |
Sammendrag - Flowcytometri vs FACS
Cellen er den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cellsortering er prosessen der celler blir isolert og differensiert i forskjellige kategorier basert på deres intracellulære og ekstracellulære egenskaper. Flowcytometri og FACS er to viktige metoder i cellesortering. Begge prosessene er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper. Flowcytometri er en metodikk som brukes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess der en prøveblanding av celler sorteres i henhold til deres lysspredning og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er forskjellen mellom flowcytometri og FACS.
Last ned PDF-versjonen av Flow Cytometry vs FACS
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til frakoblede formål som angitt i en henvisning. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom flowcytometri og FACS
