Forskjellen Mellom YAC Og M13 Fagvektor

2024 Forfatter: Mildred Bawerman | [email protected]. Sist endret: 2023-12-16 08:41

Nøkkelforskjell - YAC vs M13 Phage Vector

DNA-kloning er en viktig prosess som muliggjør forplantning av viktige DNA-fragmenter av organismer. Det krever sammenføyning av spesifikt DNA med vektor-DNA for å skape rekombinant DNA som transformeres til vertsorganismen. En vektor er et DNA-molekyl som oppfører seg som et middel til å føre fremmed genetisk materiale inn i en annen celle eller organisme. Den skal kunne replikere inne i vertsorganismen og produsere flere kopier av rekombinant DNA. Det er forskjellige typer vektorer som brukes i DNA-kloning. Gjær kunstig kromosom (YAC) og M13 fagvektor er to typer blant dem. Hovedforskjellen mellom YAC og M13 fagvektor er at YAC er et kunstig kromosom som replikerer i gjærceller mens M13 fagvektor er et enkeltstrenget sirkulært DNA av bakteriofag M13 som replikerer i E Coli-celler.

INNHOLD

1. Oversikt og

nøkkelforskjell 2. Hva er YAC

3. Hva er M13 fagvektor

4. Sammenligning side om side - YAC mot M13 fagvektor

5. Sammendrag

Hva er en YAC Vector?

YAC er et kunstig bygd kromosom som har evnen til å bære et stort segment av fremmed DNA og replikere i gjærcellene. Den har sentromere, telomere og autonome replikerende sekvenser som er essensielle for replikasjon og stabilitet. YAC bør også bære en selektiv markør eller markører og begrensningssteder for å gjøre det til en effektiv kloningsvektor. Store sekvenser fra 1000 kb til 2000 kb kan settes inn i YAC og overføres til gjær.

Figur 01: YAC-vektor

Hva er M13 Phage Vector?

Bacteriophage M13 er et virus som infiserer og replikerer i E Coli. Genomet til M13-bakteriofagen er liten i størrelse, omtrent 6,7 kb. Det er et enkeltstrenget, sirkulært og positivt sanse-DNA. Dette viruset infiserer spesifikt E Coli-bakterier gjennom F pilus. Når den kommer inn i ssDNA i bakterien, syntetiserer den sin komplementære streng og blir dsDNA eller den replikative formen (RF) av M13. RF kan oppføre seg som et plasmid i vertsorganismen. DsDNA replikerer i E Coli og produserer ssDNA med nye fager. Disse nye fagene frigjøres kontinuerlig fra E Coli uten å drepe vertscellen. Imidlertid reduserer infeksjonen veksten av E Coli. dsDNA kan ekstraheres fra bakterieceller og brukes som vektorer i DNA-kloning. De er kjent som M13 fagvektorer. De kan enkelt manipuleres og brukes på samme måte som plasmidvektorer.

Den iboende evnen til infeksjon av disse M13-fagene tjener som en god kvalifikasjon for å bli brukt som en vektor i genkloning. Når M13 utvikles til en vektor, bør flere elementer inkorporeres i genomet. De er et gen for lac repressor (lac I) protein, den operatør-proksimale regionen til lac Z-genet, en lac-promotor og et multippel kloningssted (polylinker). Når dsDNA av M13 brukes som vektorer, kan den behandles som en plasmidvektor. Imidlertid har bruken av ssDNA M13 fordeler i DNA-sekvensering og stedrettet mutagenese.

Siden M13-fagvektoren bærer flere kloningssteder i lacZ-regionen, kan rekombinerte vektorer lett identifiseres ved den blå / hvite koloniscreeningen på agarplater som inneholder IPTG og X-Gal. Blå plaketter produsert på platene inneholder ikke de rekombinerte fager. Derfor kan fager med innsatser velges for kloningsformålet.

Figur 02: Bakteriofag M13

Hva er forskjellen mellom YAC og M13 Phage Vector?

Diff Article Middle before Table

YAC vs M13 Phage Vector
YAC er et genetisk konstruert kromosom som har evnen til å bære et stort segment av fremmed DNA og replikere i gjærcellene.	M13 fagvektor er en virusvektor utviklet av bakteriofag M13 som brukes til å sette inn fremmed DNA i E Coli.
Hensikt
YAC-er ble designet for å klone store fragmenter av genomisk DNA i gjær.	M13 fagvektorer brukes til å sette inn fremmed DNA i E Coli.
Sett inn lengde
YAC-er kan inneholde megabase-størrelse genomiske innsatser (1000 kb - 2000 kb).	Størrelsen på innsatsene er omtrent 1500 bps.
Konstruksjon
YAC DNA er vanskelig å rense intakt og krever høy konsentrasjon for å generere YAC vektorsystem.	Det skjer via syklisk fotosyntetisk elektronkjede.
Stabilitet
YAC er ustabil.	M13-fager kan enkelt ekstraheres.
Størrelse
Enzymer er større molekyler.	M13-fager er stabile enn YAC.

Sammendrag - YAC vs M13 Phage Vector

YAC er et kunstig konstruert vektorsystem som bruker en spesifikk region av gjærkromosom for å sette inn store segmenter av genetisk materiale i gjærceller. M13 fagvektor er et vektorsystem avledet fra bakteriofag M 13 som bruker E coli som vertsorganisme. Dette er hovedforskjellen mellom YAC og M13 Phage Vector. Begge er like nyttige i rekombinant DNA-teknologi og genkloning.