Nøkkelforskjell - YAC vs BAC-vektorer
Vektorer brukes i molekylær kloning. En vektor kan defineres som et DNA-molekyl som oppfører seg som et middel til å føre fremmed genetisk materiale inn i en annen celle. En vektor som inneholder fremmed DNA er kjent som rekombinant DNA, og den skal kunne replikere og uttrykke det i vertsorganismen. Gjær kunstig kromosom (YAC) og bakterielt kunstig kromosom (BAC) er to typer vektorer involvert i kloning. Hovedforskjellen mellom YAC og BAC er at YAC er et kunstig konstruert vektorsystem som bruker en spesifikk region av gjærkromosom for å sette inn store segmenter av genetiske materialer i gjærceller mens BAC er et kunstig konstruert vektorsystem ved bruk av en spesifikk region av E. coli-kromosom å sette inn store DNA-segmenter i E. coli-celler.
INNHOLD
1. Oversikt og
nøkkelforskjell 2. Hva er YAC-vektorer
3. Hva er BAC-vektorer
4. Sammenligning side om side - YAC vs BAC-vektorer
5. Sammendrag
Hva er YAC-vektorer?
YAC (gjær kunstig kromosom) er et kunstig bygd kromosom som har evnen til å bære et stort segment av fremmed DNA og replikere i gjærcellene. Den har en sentromer, telomerer samt autonome replikerende sekvenser som er essensielle for replikasjon og stabilitet. YAC bør også bære en selektiv markør eller markører og begrensningssteder for å gjøre det til en effektiv kloningsvektor. En stor sekvens fra 1000 kb til 2000 kb kan settes inn i YAC og overføres til gjær. Transformasjonseffektiviteten til YAC er veldig lav.
Figur 01: YAC-vektor
Hva er BAC-vektorer?
Bakterielt kunstig kromosom (BAC) er et kunstig konstruert kromosom for molekylær kloning. Den har spesifikke regioner av E. coli F plasmid, og den er sirkulær og superviklet. BAC er utviklet for å klone DNA-fragmenter til bakterier, spesielt til E. coli. Den kan bære DNA-fragmenter med størrelser opp til 300 kb. Sammenlignet med YAC har BAC-kloningsinnsats mindre størrelse. BACs ble utviklet i 1992, og det er fortsatt populært på grunn av stabilitet og enkel konstruksjon. BAC er også nyttige for å utvikle vaksiner.
Figur 02: BAC-vektor i molekylær kloning
Hva er forskjellen mellom YAC- og BAC-vektorer?
Diff Article Middle before Table
YAC vs BAC-vektorer |
|
| YAC er et genetisk konstruert kromosom med bruk av gjær-DNA for kloning. | BAC er et genetisk konstruert DNA-molekyl som bruker E. coli DNA for kloning. |
| Kjønn | |
| YAC-er ble designet for å klone store fragmenter av genomisk DNA i gjær. | BAC ble utviklet for kloning av store genomiske fragmenter i Escherichia coli. |
| Sett inn lengde | |
| YAC kan inneholde megabase-størrelse genomiske innlegg. (1000 kb - 2000 kb). | BAC kan ha innsatser på 200–300 kb eller mindre. |
| Konstruksjon | |
| YAC DNA er vanskelig å rense intakt og krever høy konsentrasjon for å generere YAC vektorsystem. | BAC er lett å rense intakt og kan enkelt konstrueres. |
| Kimerisme | |
| YAC er ofte kimære. | BAC er sjelden kimære. |
| Stabilitet | |
| YAC er ustabil. | BAC er stabil. |
| Modifikasjoner | |
| Gjærrekombinering er veldig gjennomførbar og forblir alltid aktiv. Derfor kan den generere slettinger og andre omorganiseringer i en YAC. | E. coli-rekombinasjon forhindres og slås på når det er nødvendig. Derfor reduserer det uønskede omorganiseringer i BAC. |
| Vedlikehold | |
| Manipulering av rekombinante YACs krever vanligvis at YAC overføres til E. coli for påfølgende manipulasjon. Derfor er det en møysommelig prosess. | BAC-modifisering skjer direkte i E. coli. Så det er ikke behov for DNA-overføring. Derfor er prosessen ikke arbeidskrevende. |
Sammendrag - YAC vs BAC-vektorer
YAC har blitt et viktig forskningsverktøy i kloning av prosesser på grunn av dets evne til å klone store fragmenter av DNA i vertsorganismen. Imidlertid har YAC flere ulemper som vektorer som konstruksjonsvansker, kimerisme, ustabilitet, etc. Derfor har forskere utviklet BAC-vektorer for å overvinne disse problemene. BAC er konstruert ved bruk av spesifikke regioner av E. coli-kromosom. Det er en stabil vektor og kan lett konstrueres. Lengden på DNA som BAC kan håndtere er imidlertid opptil 20 ganger mindre enn lengden på YAC. Dette er forskjellen mellom YAC og BAC vektorsystemer. I dag er BAC mer foretrukket fremfor YAC i laboratoriene.
