Hovedforskjell - Taq Polymerase vs DNA Polymerase
DNA-polymerase er et enzym som skaper nytt DNA fra byggesteinene (nukleotider). I prokaryoter og eukaryoter finnes forskjellige typer DNA-polymeraser. DNA-duplisering er mulig på grunn av tilstedeværelsen av disse spesielle enzymene, og genetisk informasjon overføres til avkommet ved innvirkning av DNA-polymeraser. Taq polymerase er en spesiell type DNA-polymerase som er termostabil og er mye brukt i PCR. Taq-polymerase finnes i termofile bakterier og renset ved in vitro DNA-replikasjon. Hovedforskjellen mellom Taq-polymerase og DNA-polymerase er at Taq-polymerase tåler høye temperaturer uten denaturering, mens andre DNA-polymeraser denaturerer ved høye temperaturer (ved proteinnedbrytende temperaturer).
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er Taq Polymerase
3. Hva er DNA Polymerase
4. Sammenligning ved siden av hverandre - Taq Polymerase vs DNA Polymerase
5. Sammendrag
Hva er Taq Polymerase?
Taq polymerase (Taq DNA polymerase) er et enzym som brukes til å syntetisere DNA in vitro ved PCR-teknikk. Den produseres av den termofile bakterien kalt Thermus aquaticus som lever i varme kilder og termiske ventilasjoner. Taq-polymerase er et termostabilt enzym som ikke brytes ned ved høye temperaturer. Taq-polymerase ble renset for første gang og publisert i Chien et al. i 1976. PCR-teknikk utføres ved hjelp av Taq-polymerase på grunn av dens evne til å tåle høye temperatur- og temperatursvingninger under PCR. Taq-polymerase katalyserer DNA-syntesen når det er primere, nukleotider og enkeltstrenget mal-DNA. Enzymet består av et enkelt polypeptid med en molekylvekt på omtrent 94 kDa. Taq-polymerase viser sin optimale aktivitet ved 80 ° C og ved 7 - 8 pH-område med nærvær av magnesiumioner. Den har både polymerase- og exonukleaseaktivitet. Enzymet består av en enkelt polypeptidkjede, og genet for Taq-polymerase inneholder høyt G- og C-innhold (67,9%).
Termostabil Taq-polymerase tillater utføring av PCR ved høye temperaturer som øker spesifisiteten til primere og reduksjon av produserende uønskede PCR-produkter (primer-dimerer). Taq-polymerase eliminerer også behovet for å tilsette nye enzymer til PCR-reaksjonen etter hver PCR-reaksjonssyklus på grunn av dens evne til å motstå høye temperaturer. Oppdagelsen av Taq-polymerase gjorde det mulig for PCR å utføre i et enkelt lukket rør i en relativt enkel maskin. På grunn av disse egenskapene til Taq-polymerase blir PCR en populær rutinemessig utført laboratorieteknikk i mange molekylærbiologiske analyser angående DNA-analyse.
Taq-polymerase er mye brukt i molekylærbiologiske teknikker, og det er behov for Taq-polymerase-produksjon i stor skala. Derfor, ved bruk av den rekombinante DNA-teknologien og genkloning, var genet som kodet for Taq DNA-polymerase blitt klonet og uttrykt i Escherichia coli. Dette har i stor grad gjort det lettere å produsere rekombinant Taq-polymerase og redusere prisen på dette enzymet for tilstrekkelig bruk.
Figur 1: Taq Polymerase
Hva er DNA-polymerase?
DNA-polymerase er et enzym som katalyserer syntesen av DNA fra nukleotider. Det er det mest nøyaktige enzymet som er ansvarlig for å duplisere genomer og overføre genetisk informasjon til avkom. Under celledeling dupliserer DNA-polymerase alt DNA og sender en kopi til hver dattercelle. I 1955 ble Arthur Kornberg oppdaget DNA-polymerase i E Coli. Funksjonen til DNA-polymerase avhenger av flere krav; mal-DNA, Mg +2- ioner, alle fire typer deoksynukleotider (dATP, dTTP, dCTP og d GTP), og en kort sekvens av RNA (primer). Syntese av DNA gjøres i retning av 5'to 3 'av DNA-polymerase.
DNA-polymeraser kan grupperes i syv forskjellige familier: A, B, C, D, X, Y og RT (Reverse transcriptase). Retrovirus koder for RT; en uvanlig DNA-polymerase som trenger en RNA-mal for DNA-syntese. Det er fem forskjellige typer DNA-polymeraser som finnes i prokaryoter for forskjellige roller i DNA-replikasjonen. DNA-polymerase 3 er ansvarlig for polymeriseringen av den nye DNA-strengen. DNA-polymerase 1 er ansvarlig for å reparere og lappe DNA. DNA-polymeraser 2, 4 og 5 er ansvarlige for reparasjon og korrekturlesing av DNA. I eukaryoter er det 15 forskjellige typer DNA-polymeraser. De inkluderer fem store familier.
Figur 2: DNA-polymerase
DNA-polymeraser brukes i genkloning, PCR, DNA-sekvensering, SNP-deteksjon, molekylær diagnostikk, etc. Taq-polymerase er en slags DNA-polymerase som tåler høye temperaturer og er tilgjengelig for DNA-syntese uten nedbrytning.
Hva er forskjellen mellom Taq Polymerase og DNA Polymerase?
Diff Article Middle before Table
Taq Polymerase vs DNA Polymerase |
|
| Taq DNA-polymerase er et enzym som skaper DNA. Det er et termostabilt enzym som finnes i termofiler | DNA-polymerase er et enzym som letter DNA-replikering og finnes i både prokaryote og eukaryote organismer. |
| Nedbrytning ved høye temperaturer | |
| Taq-polymerase er aktiv ved høye temperaturer. | DNA-polymeraser brytes ned ved proteindenaturering ved høye temperaturer. |
| Bruk | |
| Dette er mye brukt i PCR | Taq-polymerase erstattet DNA-polymerase fra coli som opprinnelig ble brukt i PCR. |
Sammendrag - Taq Polymerase vs DNA Polymerase
DNA-polymeraser er enzymer som syntetiserer DNA fra deoksynukleotider (byggesteiner av DNA) når malen og primere er tilgjengelige. DNA-polymeraser kreves for å duplisere cellenes DNA og passere i identiske datterceller under celledelingen. DNA-polymeraser tilfører nye nukleotider til 3'-enden av primeren og forlenger den nye DNA-streng-syntesen i 5 'til 3'-retning. Taq DNA-polymerase er et av et DNA-polymeraseenzym som er svært nyttig i polymerasekjedereaksjon (PCR) -metode for DNA-amplifikasjon. E. coli DNA-polymerase 1 ble brukt tidligere for PCR, men kommersiell Taq-polymerase fortrengte den på grunn av dens høye spesifisitet for primerbinding ved forhøyede temperaturer og produksjon av et høyere utbytte av det ønskede produktet med mindre uspesifikt amplifikasjonsprodukt. Dette er forskjellen mellom Taq Polymerase og DNA Polymerase.
