Nøkkelforskjell - In situ hybridisering vs immunhistokjemi
Diagnose av kreft og smittsomme sykdommer er en populær trend der nye proteomikk- og genomikkbaserte teknikker brukes til å identifisere svulster eller smittsomme celler, dets spredning og steder for celleutvikling og analysere det genetiske grunnlaget for mest smittsomme og ikke-smittsomme sykdommer. Dette vil resultere i nøyaktig medisinbehandling og design og i utvikling av tilpassede terapier for sykdommer. In situ hybridisering (ISH) og immunhistokjemi (IHC) er to så mye brukte teknikker innen kreftbiologi, og nøkkelforskjellen mellom in situ hybridisering og immunokjemi ligger i molekylene som brukes i analyseprosedyren. I ISH brukes nukleinsyresondene i analysen, mens det i IHC brukes monoklonale og polyklonale antistoffer for de diagnostiske bestemmelsene.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er in situ-hybridisering
3. Hva er immunhistokjemi
4. Likheter mellom in situ-hybridisering og immunhistokjemi
5. Sammenligning ved siden av hverandre - In situ-hybridisering vs immunhistokjemi i tabellform
6. Oppsummering
Hva er in situ hybridisering (ISH)?
In situ hybridisering er en nukleinsyrehybridiseringsteknikk som utføres direkte på en del eller del av vev, i hele vevet eller i celler. Teknikken avhenger av teorien om Watson Crick komplementær baseparring, noe som resulterer i enten DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider som kan oppdage muterte gener eller identifisere det nødvendige genet av interesse. Enkeltstrengte DNA-sekvenser, dobbeltstrengede DNA-sekvenser, enkeltstrengede RNA-sekvenser eller syntetiske oligonukleotidsekvenser brukes som prober under hybridiseringsteknikk, og disse sonder er merket med et radioaktivt fosfor i 5'-enden for identifikasjonsprosedyrer ved autoradiografi eller merket ved bruk av fluorescerende fargestoffer. Det finnes forskjellige typer ISH-teknikker tilgjengelig basert på hvilken type probe som brukes og hvilken type visualiseringsteknikk som følges.
Figur 01: Fluorescerende in situ-hybridisering
Det er mange anvendelser av ISH, hovedsakelig i molekylær diagnostikk av smittsomme sykdommer for å identifisere tilstedeværelsen av patogener og for å bekrefte patogenet via molekylær diagnostikk. Den brukes også innen utviklingsbiologi, karyotyping og fylogenetisk analyse og fysisk kartlegging av kromosomer.
Hva er immunhistokjemi (IHC)?
I teknikken til IHC er det analyserte hovedmolekylet antigenet. Under IHC brukes monoklonale og polyklonale antistoffer for å bestemme tilstedeværelsen av antigener etter infeksjon eller ondartet celleproliferasjonsstatus. Teknikken er basert på antigen-antistoffbinding, og enzymmerker brukes til denne teknikken; en slik anvendelse er ELISA (Enzymkoblet immunosorbentanalyse). Markørene kan også være fluorescerende merkede antistoffer eller radiomerkede antistoffer.
Figur 02: Immunhistokjemi
IHC er mye brukt for deteksjon av kreftceller. Diagnostiske prosedyrer retter seg mot antigenene som er tilstede på tumorcellene for å identifisere og karakterisere svulsten. Den samme prosedyren er innarbeidet for å diagnostisere smittsomme stoffer. Monoklonale og polyklonale antistoffer brukes også til å analysere forskjellige genprodukter ved å muliggjøre antistoff-antigenbindingsreaksjonen mellom ønsket protein og det administrerte syntetiske antistoffet.
Hva er likhetene mellom in situ-hybridisering og immunhistokjemi?
- ISH og IHC er svært spesifikke reaksjoner.
- Begge teknikkene er svært nøyaktige.
- Begge teknikkene kan brukes i diagnostikk for kreft og smittsomme sykdommer.
- Disse teknikkene utføres i sterile in vitro-miljøer.
- Begge er raske teknikker som gir reproduserbare resultater.
- ISH og IHC bruker deteksjonsmetoder som radiomerking og fluorescensteknikker.
Hva er forskjellen mellom in situ hybridisering og immunhistokjemi?
Diff Article Midt før tabell
In situ-hybridisering vs immunhistokjemi |
|
| ISH er en nukleinsyre-hybridiseringsteknikk som utføres direkte på en del eller del av vevet eller hele vevet. | IHC er en teknikk der monoklonale og polyklonale antistoffer brukes til å bestemme tilstedeværelsen av antigener, som er spesielle proteinmarkører plassert på celleoverflatene. |
| Type analyserte biomolekyler | |
| ISH analyserer nukleinsyrer. | IHC analyserer proteiner-antigener. |
| Grunnlag for biokjemisk reaksjon | |
| Komplementær baseparring mellom DNA-DNA eller DNA-RNA forekommer i denne teknikken. | Antigen-antistoffinteraksjoner er involvert i immunhistokjemi. |
| Enzymkoblede deteksjonsmetoder | |
| Enzymkoblede deteksjonsmetoder kan ikke brukes i ISH. | Enzymkoblede deteksjonsmetoder kan brukes i IHC. |
Sammendrag - In situ hybridisering vs immunhistokjemi
Molekylær diagnostikk er raske og bekreftende metoder som kan brukes til å identifisere en ikke-smittsom sykdom slik som kreft eller smittsom sykdom slik som HIV eller tuberkulose, basert på de molekylære markørene som er tilstede på cellene som fører til manifestasjonen av sykdommen. Molekylære markører kan være til stede i form av uttrykte proteiner eller på genetisk nivå basert på hvilke forskjellige nye teknikker blir introdusert for å øke effektiviteten og er mindre arbeidskrevende, selv om det er høye kostnader involvert med disse teknikkene. Dermed avhenger ISH av DNA-DNA eller DNA-RNA hybriddannelse, og IHC avhenger av de spesifikke reaksjonene mellom antistoff og antigen. Dette er forskjellen mellom in situ hybridisering.
Last ned PDF-versjon av In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til frakoblede formål som angitt i en henvisning. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom in situ-hybridisering og immunhistokjemi.
