Nøkkelforskjell - Immunfluorescens vs Immunhistokjemi
Sykdomsdiagnostikk, som bruker molekylærbiologiske metoder, har blitt et voksende område av klinisk laboratorieteknologi. Den inkluderer alle tester og metoder for å identifisere en sykdom og forstå årsaken til en sykdom ved å analysere DNA, RNA eller uttrykte proteiner i en organisme. Raske fremskritt innen molekylær diagnostikk har muliggjort grunnleggende forskning om smittsomme og ikke-smittsomme sykdommer. Disse brukes til å bestemme endringer i sekvens- eller ekspressjonsnivåer i viktige gener eller proteiner involvert i sykdom. Immunfluorescens (IF) og Immunohistochemistry (IHC) er to så mye brukte teknikker innen kreftbiologi. IF er en type IHC der en fluorescensdeteksjonsmetode brukes til å analysere monoklonale og polyklonale antistoffer, mens IHC bruker kjemiske baserte metoder for å oppdage de monoklonale og polyklonale antistoffene. Dette er nøkkelforskjellen mellom IF og IHC.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er immunfluorescens
3. Hva er immunhistokjemi
4. Likheter mellom immunfluorescens og immunhistokjemi
5. Sammenligning side om side - Immunofluorescens vs immunhistokjemi i tabellform
6. Sammendrag
Hva er immunfluorescens (IF)?
Immunfluorescens er en deteksjonsteknikk der antistoffene som brukes i analysen er merket ved hjelp av fluorescerende fargestoffer eller fluorescerende proteiner for deteksjonsformålet. Merkede sekundære antistoffer kan resultere i uønskede bakgrunnssignaler; Derfor er IF-teknikken basert på merking av selve det primære antistoffet for øyeblikket for å unngå uønskede signaler under påvisning. Gjennom denne teknikken forhindres ikke-spesifikk binding mellom det primære og det sekundære antistoffet, og det er raskere siden det ikke er noe sekundært inkubasjonstrinn involvert. Datakvaliteten forbedres også.
Figur 01: Dobbel immunfluorescensfarging for BrdU, NeuN og GFAP
Fluorokromer eller fluorescerende fargestoffer er forbindelser som kan absorbere stråling, fortrinnsvis ultrafiolett stråling som blir eksitert. Når partiklene når grunntilstanden fra den eksiterte tilstanden, avgir de stråling som fanges opp og oppdages av en detektor for å danne et spektrum. Det er av stor betydning at den fluorescerende etiketten er kompatibel og stabil for den spesielle reaksjonen, og den bør konjugeres riktig til antistoffet for å oppnå nøyaktige resultater. En av de mest brukte fluorokromene er fluoresceinisotiocyanat (FITC), som har grønn farge, med absorpsjons- og utslippstoppbølgelengder på henholdsvis 490 nm og 520 nm. Rhodamine, et annet middel som brukes i IF, har rød farge og har tydelige absorpsjons- og utslippstoppbølgelengder på 553 nm og 627 nm.
Hva er immunhistokjemi (IHC)?
IHC er en molekylær testmetode som praktiseres for å identifisere og bekrefte tilstedeværelsen av antigenet i målcellen. Målcellen kan være en smittsom partikkel, et mikrobielt patogen eller en ondartet svulstcelle. IHC benytter monoklonale og polyklonale antistoffer for å bestemme tilstedeværelsen av antigener som er tilstede på celleoverflaten til målcellene. Teknikken er basert på antigen-antistoffbinding. En deteksjonsmarkør er konjugert til disse antistoffene for å detektere tilstedeværelsen eller fraværet av det spesielle antigenet. Disse markørene kan være kjemiske markører som enzymer, fluorescerende merkede antistoffer eller radiomerkede antistoffer.
Figur 02: Mus-hjerne-skive farget av immunhistokjemi
Den mest populære anvendelsen av IHC er i kreftcellebiologi for å identifisere tilstedeværelsen av ondartede svulster, men det brukes også til påvisning av smittsomme sykdommer.
Hva er likhetene mellom immunfluorescens og immunhistokjemi?
- Immunfluorescens og immunhistokjemi foregår under in vitro forhold.
- Begge teknikkene er basert på antigen-antistoffet
- Begge er veldig raske teknikker.
- Resultatene av teknikkene er reproduserbare.
- Begge har forbedret datakvalitet.
- Disse teknikkene brukes i diagnostikk for kreft og smittsomme sykdommer.
Hva er forskjellen mellom immunfluorescens og immunhistokjemi?
Diff Article Midt før tabell
Immunfluorescens vs immunhistokjemi |
|
| IF er en deteksjonsteknikk der antistoffene som brukes i analysen er merket med fluorescerende fargestoffer eller fluorescerende proteiner for påvisning. | IHC er en deteksjonsteknikk der antistoffene som brukes i analysen er merket med kjemikalier eller radioaktive elementer for påvisning. |
| Nøyaktighet | |
| Nøyaktighet er høyere i IF-teknikk sammenlignet med IHC. | Nøyaktigheten er lavere i IHC. |
| Spesifisitet | |
| IF er mer spesifikk. | IHC er mindre spesifikk. |
Sammendrag - Immunfluorescens vs Immunhistokjemi
Molekylære mekanismer har ført til mange endringer innen medisinfeltet, noe som har ført til avanserte molekylære testmetoder som har ført til revolusjoner innen diagnostikk. Disse oppfinnelsene har ført til en rask og nøyaktig identifisering og bekreftelse av sykdommen, noe som muliggjør vellykket administrering og produksjon av medisiner. Disse teknikkene brukes også i farmakologi for å finne legemidlene og for å bekrefte de farmakokinetiske egenskapene til legemidlet under stoffskifte. IF og IHC er to diagnostiske metoder som er basert på begrepet antigen og antistoffbinding, selv om deteksjonsmåten i begge teknikker er forskjellig. IF bruker prinsippet om fluorescens for å oppdage antigenet og IHC bruker konseptet med kjemisk konjugasjon for å oppdage antigenet. Dette er forskjellen mellom IF og IHC.
Last ned PDF-versjon av immunfluorescens vs immunhistokjemi
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til frakoblede formål som angitt i en henvisning. Vennligst last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom immunfluorescens og immunhistokjemi.
