Nøkkelforskjell - HPLC vs HPTLC
Hovedforskjellen mellom HPLC og HPTLC er at HPLC tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve, mens HPTLC ikke tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve.
Kromatografi er en fysisk separasjonsmetode som brukes til å skille og identifisere komponentene i en blanding. Både HPLC og HPTLC er kromatografiske teknikker. HPLC er væskekromatografi med høy ytelse. HPTLC er tynnsjiktskromatografi med høy ytelse.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er HPLC
3. Hva er HPTLC
4. Sammenligning side om side - HPLC mot HPTLC i tabellform
5. Sammendrag
Hva er HPLC?
HPLC er høyytelses væskekromatografi. Det er en analytisk teknikk som brukes til å skille, identifisere og kvantifisere komponenter i en blanding. I denne teknikken oppløses prøven i et egnet løsningsmiddel. Deretter føres løsningsmidlet med prøven gjennom en pumpe med et gitt trykk. Pumpen er fylt med solid adsorberende materiale. Deretter binder noen komponenter seg sterkt til det absorberende materialet, mens andre komponenter binder løst. Dette fører til at komponentene har forskjellige strømningshastigheter gjennom pumpen. Derfor kan komponentene enkelt skilles fra hverandre.
Figur 01: Et HPLC-system
Det adsorberende materialet som fyller pumpen er kjent som den stasjonære fasen. Løsningsmidlet med den oppløste prøven er kjent som den mobile fasen. Pumpen som brukes i denne teknikken kalles kolonnen. Kolonnen er fylt med et adsorberende materiale, oftest silisiumpartikler. Størrelsen på disse partiklene kan variere fra 2-50 mikrometer. Separasjonsprosessen påvirkes av sammensetningen av den mobile fasen og temperaturen i systemet. Interaksjonene mellom den stasjonære fasen og komponenten i prøven kan være hydrofobe interaksjoner, dipol-dipolinteraksjoner, ionebinding osv.
Driftstrykket til HPLC er betydelig høyere enn ved tradisjonell væskekromatografi. Den ligger rundt 50-350 bar. Forskjellen mellom væskekromatografi og HPLC er at i væskekromatografi faller prøven gjennom kolonnen under tyngdekraften, mens prøven under HPLC blir satt under trykk gjennom kolonnen. Kolonnens størrelse og de absorberende partiklene er også veldig små sammenlignet med tradisjonell væskekromatografi. Imidlertid er oppløsningen gitt av HPLC-teknikken overlegen.
Hva er HPTLC?
HPTLC er tynnsjiktskromatografi med høy ytelse. Det er den avanserte og automatiserte formen for tradisjonell TLC. Denne teknikken gir en effektiv oppløsning på kort tid. I denne analysemetoden kan prøven og en referanse analyseres samtidig, slik at prøven kan sammenlignes med referansen. Det gir en bedre analytisk nøyaktighet enn andre kromatografiske teknikker. Tiden det tar for analysen er mindre. Teknikken er en billig teknikk.
Figur 02: En analyse av matfargestoffer ved bruk av HPTLC
HPTLC-metoden er en enkel prosess, og prøvetilberedningstrinnet elimineres også (i tradisjonell TLC er prøvenes tilberedningstrinn inkludert før separasjonen. Dette trinnet innebærer rengjøring og berikelse). Løsningsmidlet kan brukes direkte uten forbehandling, selv om andre kromatografiske teknikker krever forbehandling som avgassing, filtrering, etc.
Det adsorberende materialet som brukes i HPTLC er silisiumdioksyd med veldig små partikkelstørrelser. I tradisjonell TLC er partikkelstørrelsen på silisiumdioksid 5-20 mikrometer, mens det i HPTLC er 4-8 mikrometer. Prøven påføres HPTLC-platen ved hjelp av en applikator. Det gir en jevn og sikker påføring. Deretter plasseres platene i et kammer med den mobile fasen. Kammeret skal være mettet med dampen fra den mobile fasen. Etter HPTLC-prosessen kan flekkene som har flyttet seg oppdages. Når det oppdages flekkene på platen, bruker HPTLC-teknikken et passende UV-område eller et jodkammer.
Hva er forskjellen mellom HPLC og HPTLC?
Diff Article Midt før tabell
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC er væskekromatografi med høy ytelse. | HPTLC er tynnsjiktskromatografi med høy ytelse. |
| Teknikk | |
| I HPLC føres den mobile fasen med løsningsmidlet gjennom en kolonne fylt med den stasjonære fasen. | I HPTLC blir prøven oppdaget på en TLC-plate og plasseres inne i et kammer som inneholder den mobile fasen; så får prøven migrere oppover platen sammen med mobilfasen. |
| Mål | |
| I HPLC brukes forskjellene mellom strømningshastigheter av komponenter gjennom kolonnen for å skille komponentene i prøven. | I HPTLC brukes forskjellene mellom avstandene som er reist av hver komponent i prøven for å skille komponentene i prøven. |
| Kvantitativ separasjon | |
| HPLC tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve. | HPTLC tillater ikke kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve. |
Sammendrag - HPLC vs HPTLC
HPLC og HPTLC er to kromatografiske teknikker. Hovedforskjellen mellom HPLC og HPTLC er at HPLC tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve, mens HPTLC ikke tillater kvantitativ separasjon av komponenter i en prøve.
