Nøkkelforskjell - RPMI vs DMEM
De fleste forskningsstudier involverer dyrecelledyrking, og derfor krever disse studiene vedlikehold av dyrecellelinjer under spesielle vekstforhold. Dyrecelledyrking utføres mye i farmakologiske studier for å identifisere stoffskifte, i sykdomsdiagnostikk og i kreftforskning. Cellekulturmediet er et viktig aspekt av dyrecellekulturen. Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) er to kulturmedier som brukes i dyrecelledyrking. RPMI er et medium som brukes mye for å dyrke pattedyrceller i suspensjonskultur. DMEM er en modifisert type basalmedium, med økte aminosyrer og vitaminkonsentrasjoner opptil en firdobling. DMEM brukes i dyrking av celler i sammenhengende kulturer. Hovedforskjellen mellom de to mediene er medietypen. RPMI brukes på suspensjonskulturer, mens DMEM brukes til å dyrke adherente celler.
INNHOLD
1. Oversikt og nøkkelforskjell
2. Hva er RPMI
3. Hva er DMEM
4. Likheter mellom RPMI og DMEM
5. Sammenligning side om side - RPMI vs DMEM i tabellform
6. Sammendrag
Hva er RPMI?
RPMI eller Roswell Park Memorial Institute Medium blir også referert til som RPMI 1640. Navnet på media ble hentet av instituttet der media ble oppdaget. Dette mediet brukes ofte i dyrecellekultur, spesielt for vekst av pattedyrceller. De ble opprinnelig utviklet for å dyrke humane lymfocytter.
Følgende ingredienser er inkludert i RPMI.
- Glukose
- pH-indikator (fenolrød)
- Salter (natriumklorid, natriumbikarbonat, dinatriumfosfat, kaliumklorid, magnesiumsulfat og kalsiumnitrat)
- Aminosyrer
- Vitaminer (i-inositol, kolinklorid, para-aminobensoesyre, folsyre, nikotinamid, pyridoksinhydroklorid, tiaminhydroklorid, kalsiumpantotenat, biotin og riboflavin, cyanokobalamin)
Det spesielle ved RPMI er den økte konsentrasjonen av fosfat i mediet. RPMI brukes i en 5% karbondioksidatmosfære. Dette vil gi maksimale og optimale forhold for celleveksten. Mediets pH holdes på 8,0 av bikarbonatbuffersystemet.
Figur 01: Cellekultur på en petriskål
Anvendelser av RPMI i cellekultur
- Dyrking av humane T- og B-lymfocytter, benmargceller og hybridom.
- Brukes til å studere humane neoplastiske celler.
Hva er DMEM?
Dulbeccos Modified Eagle's Medium (DMEM) er et modifisert medium som er kommersielt fremstilt. Den originale strukturen til mediumpulveret er gul. I DMEM økes vitaminkonsentrasjonen opp til fire ganger og øker næringsinnholdet i mediet.
DMEM modifiseres også ved å tilsette flere salter som jernnitrat, natriumpyruvat og noen ikke-essensielle aminosyrer som serin og glycin. Formuleringen av glukose i media endres også. Den opprinnelige formuleringen er sammensatt av 1000 mg / l glukose, mens i DMEM økes konsentrasjonen til 4500 mg / L. DMEM krever også tilskudd av et serummedium, da det ikke er et komplett medium. Oftest suppleres DMEM med føtalt bovint serum (FBS). FBS gir de nødvendige proteiner og vekstfaktorer for dyrkingsprosessen.
Mediumets pH varierer ved tilsetning av natriumbikarbonat. Mediumets pH før tilsetning av natriumbikarbonat er rundt 6,80 - 7,40, mens pH etter tilsetning av natriumbikarbonat ligger i området 7,60 - 8,20. Lagringstemperaturen til mediet er 2 - 8 0 C.
Figur 02: DMEM
Søknader om DMEM
- Å studere plakkdannende evne til polyomavirus i embryonale celler fra mus.
- I kontaktinhiberingsstudier.
- I forskning og analyse kyllingcellekulturer.
Hva er likhetene mellom RPMI og DMEM?
- Både RPMI og DMEM brukes i dyrecellekultur.
- Både RPMI og DMEM media er flytende formuleringer.
- Både RPMI- og DMEM-medier inneholder essensielle aminosyrer, vitaminer og uorganiske salter som kreves for vekst.
- Både RPMI og DMEM media er ufullstendige. Derfor bør serum tilsettes.
- Både RPMI og DMEM media bruker glukose som karbonkilde.
- Både RPMI og DMEM media har høyere pH.
Hva er forskjellen mellom RPMI og DMEM?
Diff Article Midt før tabell
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI er et medium som brukes mye til å dyrke pattedyrceller i en suspensjonskultur. | DMEM er en modifisert type basalmedium med økte aminosyrer og vitaminkonsentrasjoner. |
| Tilstedeværelse av ekstra fosfater | |
| Til stede i RPMI. | Fraværende i DMEM. |
| Bruk | |
|
Brukes til å dyrke celler i sammenhengende kulturer. Det er vant til,
|
| Typer kultur | |
| RPMI brukes til suspensjonskulturer. | DMEM brukes til kulturer med celle overholdt. |
Sammendrag - RPMI vs DMEM
Både RPMI og DMEM er mye brukt i dyrecelledyrking, spesielt for å dyrke dyrecellelinjer inkludert lymfocytter in vitro. DMEM er et modifisert basalmedium der det er en økt næringskonsentrasjon. RPMI utviklet av Roswell Park Memorial Institute, og det er også et medium brukt i dyrecelledyrking spesielt for lymfocytter fra pattedyr. Begge medier er kommersielt tilgjengelige. Dette er forskjellen mellom RPMI og DMEM.
