Nøkkelforskjell - HPLC vs LCMS
La oss først se på betydningen av HPLC og LCMS før vi analyserer forskjellen mellom HPLC og LCMS. Kromatografi er en separasjonsteknikk i kjemisk analyse der prøvelementene skilles fra hverandre gjennom passering gjennom et kromatografisk medium. Det innebærer også interaksjon med prøve, stasjonær fase og mobil fase. HPLC står for High Performance Liquid Chromatography, og det brukes som en væskekromatografimetode i analytisk kjemi. Kombinasjonen av væskekromatografi og massespektroskopi (LCMS) er utviklet for kvantitativ analyse av utvalgte biomolekyler, og det er en svært sensitiv, nøyaktig og spesifikk analyseprosedyre sammenlignet med HPLC. Dette er nøkkelforskjellen mellom HPLC og LCMC. Denne artikkelen vil introdusere deg for HPLC og LCMC som omhandler kjemisk analyse og diskutere forskjellene mellom HPLC og LCMS.
Hva er HPLC?
Høyytelses væskekromatografi (HPLC) er en populær separasjonsteknikk innen analytisk kjemi. Den brukes hovedsakelig for å skille komponentene, for å identifisere og kvantifisere hver komponent i en blanding. Tidligere var denne metoden kjent som høytrykks væskekromatografi fordi den var avhengig av pumper for å strømme et flytende løsemiddel under trykk som omfattet prøveblandingen gjennom en kolonne pakket med et fast adsorberende materiale. Hver bestanddel i prøveblandingen samhandler forskjellig med det faste adsorberende materialet, noe som resulterer i forskjellige strømningshastigheter for forskjellige bestanddeler. Dette kan føre til separasjon av bestanddelene når de strømmer ut av HPLC-kolonnen.
HPLC har blitt brukt til forskjellige applikasjoner, for eksempel analyse av vitamin D-nivåer i blod, ulovlig narkotikabruk av idrettsutøvere ved å oppdage stoffrester i urinen, sortere ut bestanddelene i en kompleks biologisk prøve for forskningsformål og analysere og produsere legemidler.
Hva er LCMS?
Væskekromatografi – massespektrometri (LCMS) er en analytisk teknikk som kombinerer de fysiske separasjonsevnene til væskekromatografi med masseanalysefunksjonene til massespektrometri (MS). Væskekromatografi er en separasjonsteknikk, og massespektrometri brukes til å analysere forholdet mellom masse og ladning av ladede partikler. Den fysiske separasjonen oppnås vanligvis ved HPLC og alternativt LCMS også kjent som HPLC-MS. LCMS er en dominerende analytisk teknikk som har svært høy nøyaktighet, følsomhet og spesifisitet sammenlignet med HPLC. Dermed er det nyttig i mange applikasjoner som forskningsformål, medikamentanalyse, matanalyse, etc. LCMS brukes hovedsakelig til å separere, for å oppdage, identifisere og kvantifisere biokjemiske egenskaper til en bestemt prøve i nærvær av komplekse kjemiske blandinger.
Hva er forskjellen mellom HPLC og LCMC?
Forkortelse og definisjon av HPLC og LCMC
HPLC: HPLC står for høyytelses væskekromatografi. Det er en separasjonsteknikk som hovedsakelig brukes til å skille komponentene, for å identifisere og kvantifisere hver komponent i en blanding.
LCMS: LCMS står for væskekromatografi og massespektrometri. Det er en analytisk teknikk som kombinerer de fysiske separasjonsevnene til væskekromatografi med masseanalysefunksjonene til massespektrometri (MS).
Kjennetegn ved HPLC og LCMC
Klassifisering
HPLC: Dette er bare en væskekromatografimetode.
LCMS: Dette er en kombinasjon av væskekromatografimetode og massespektrometri-metoden.
Effektivitet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre effektiv og tregere.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen effektiv og raskere.
Følsomhet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre følsom.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mer følsom.
Spesifisitet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre spesifikk.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mer spesifikk.
Nøyaktighet
HPLC: HPLC gir mindre nøyaktige resultater enn LCMS for bestemmelse av noen kjemikalier.
LCMS: LCMS gir mer nøyaktige resultater enn HPLC for bestemmelse av noen kjemikalier.
Komponent
HPLC: HPLC kan betraktes som en komponent i LCMS.
LCMS: LCMS kan ikke betraktes som en komponent i HPLC.
Ionkilde
HPLC: Ionkilde eksisterer ikke i HPLC-instrument.
LCMS: Ionkilden er tilstede i LCMS-instrumentet.
applikasjoner
HPLC: ioner, polymerer, organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres ved hjelp av HPLC.
LCMS: Organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres. I motsetning til HPLC kan LCMS brukes til å undersøke ufullstendig oppløste blandinger.
Operasjon
HPLC: Diagrammet til et HPLC-instrument er gitt i figur 1, og det inkluderer vanligvis en autosampler, pumper og en detektor. Prøvetakeren introduserer prøveblandingen i den mobile fasen (trykkblanding av løsningsmidler som vann, acetonitril og / eller metanol) som overfører den til kolonnen. Pumpene leverer ønsket strømning og sammensetning av den mobile fasen gjennom kolonnen. Kolonnen er fylt med adsorbenten, som er en kornete fast partikkel som silisiumdioksyd eller polymerer. Detektoren produserer et signal som er proporsjonalt med mengden av prøvebestanddelens tilstedeværelse i kolonnen, og tillater derfor kvantifiserbar analyse av de utvalgte prøvebestanddelene. HPLC-instrumentet styres, og dataanalyse leveres av en digital mikroprosessor og brukerprogramvare.
Figur 1: Diagram over HPLC-instrument
LCMS: Diagrammet over LCMS-instrumentet er gitt i figur 2. Prøveekstrakten settes inn i kolonnen bestående av HPLC. Denne kolonnen beholder prøvenes metabolitter basert på fysiske tegn, og forskjellige metabolitter strømmer til massespektrometeret ved forskjellige tidsintervaller. Massespektroskopi brukes til å vurdere masser av partikler, for å bestemme elementarrangementet til et molekyl og for å avklare molekylstrukturen. Imidlertid bør prøven ioniseres for å generere ladede molekyler for å bestemme forholdet mellom masse og ladning. Derfor, i stedet for HPLC-instrumenter, består LCMS i tillegg tre moduler som jernkilde, en masseanalysator og en detektor. En ionekilde kan transformere gassfaseprøve til ioner og en masseanalysator som grupperer ionene etter massene ved hjelp av elektromagnetiske felt. Til slutt,en detektor kvantifiserer verdiene og leverer data for hvert ion som er tilstede i prøven. LCMS-teknikken kan brukes til både kvalitative og kvantitative applikasjoner.
Figur 2: Diagram over LCMS-instrumentet
Avslutningsvis er HPLC en væskekromatografimetode, mens LCMS er en kombinasjon av væskekromatografi og massespektrometri. Begge disse analyseteknikkene har forskjellige egenskaper, men de kan brukes til å identifisere og kvantifisere matsammensetninger, legemidler og andre bioaktive molekyler.
